达学堂·答疑讨论
Q:小组织怀疑癌,腺瘤,一有问题的片子一切,显微镜下看都是裂纹、刀口,是为什么?
答:腺瘤本身细胞特别丰富,确实容易切碎,可能是脱水脱得有点过。最好是大小标本分开脱水,小标本脱水的时间要设置得比较短一点,另外切片的时候可以浸泡一下冰水。
如果蜡块总体偏脆的话也可以换熔点稍低的高质量石蜡,最好是颗粒蜡。
Q:封片是选择干封还是湿封?
答:选择湿封。干封和湿封的效果差别还是挺大的,有条件的话还是要选择湿封,注意改善通风换气条件,保护自身健康。
Q:水溶性伊红染色第一天特别红,但衰减特别快,第三天和第一天染出来效果差别很大。
答:水溶性伊红的染色力相对差一点,容易出现衰减,我们是通过调节染色时间、水洗时间以及适当补充冰醋酸来维持稳定。
还有就是要注意染液的量和片子数量的关系,染液少、片子多肯定消耗大。
进入伊红前要尽量沥干水分,否则每次染色都带较多水分的话,伊红很快就稀释了,当然染色力下降。
Q:淋巴结染色容易脱片,容易有裂纹,可能是什么原因呢?
答:可能是固定不好。因为淋巴结有一层包膜,很致密,固定液很难渗进去,固定不好很容易脱片。
另外,玻片要清洁,烤片时间和温度要足够,建议65-70℃×30min以上,玻片要立起来烤片,防止玻片和组织之间有水分。
淋巴结是个细胞很丰富的组织,在切片的时候是很容易出现裂纹的,可以用冰水浸泡的方法,粗修以后在冰水中浸泡1分钟以上,再换新刀匀速轻柔地切片,这样会比较好。当然前提还是脱水、固定这些前处理要做得好。
Q:片子总是发灰,怎么解决?
答:一个可能是封片的时候没有湿封,要做一下对比。还有一个可能是在封片前最后一缸无水酒精含有比较多的水分,比较潮湿。当然,苏木素和伊红如果颜色不鲜艳的话,看起来也会灰灰的。
Q:HE染色过蓝,怎么重染?
答:一般我们是比较喜欢染色能力强的染料,因为比较担心染不上色。过蓝的话,一是缩短染色时间、二是加强分化的程度,从这两方面进行调整就可以。如果染好的片子过蓝,建议重新切一张重新染色。过程中要摸索它的染色条件,熟悉片子的染色变化,根据具体情况调节染色时间。也可以每天正式染色前先试染两三张片子摸摸条件。
Q:冰冻苏木素不上色是什么原因?
答:首先要分析一下用的是什么苏木素、苏木素成不成熟、染色时间够不够,还有固定的情况,如果固定不好的话,也是不容易上色的。