达学堂·答疑讨论
Q:高压修复好还是沸腾修复好?修复后自然冷却好还是瞬时降温好?高压锅怎么选择呢?高压锅是不是必须要医用的?
答:选择高压修复可以减少修复时间,如果是碱性修复要注意自然冷却时会造成过度修复,因为在自然冷却时修复液还是会维持较长时间的高温状态;高压锅不一定要专门医用的。
Q:隔热高压锅修复的时候时间怎么把握?EDTA ph8.0和9.0修复抗原时统一用8.0可以吗?
答:具体时间要实际去摸索,可以用8.0的修复液。
Q:请问穿刺标本(如肺穿)、固定不好标本在碱修复时是不是更容易修复过度呢?
答:所有组织在碱性修复时如果时间没控制好都有可能造成过度修复;穿刺标本、固定不好标本在碱修复时如果修复时间没控制好还容易造成脱片。
Q:抗原修复对特殊染色结果有影响吗?
答:可能有影响,这个主要是现在已经有文献报道了。
Q:pbs的作用是?
答:免疫组化染色过程中用一定PH值和离子强度的缓冲液清洗主要是为了保持抗原抗体的最佳反应状态,促进反应。
Q:抗原修复是要严格按照厂家规定的,还是常用的要自己摸索?近期微卫星那四项总是不稳定,问了厂家也无能为力,我们柠檬酸高压是冒气两分钟啊,显色完成复染以后要是颜色不太深,是不是不用分化?
答:抗原修复可以根据自家组织处理情况作适当的调整,复染后的苏木素不深的话,可以不分化,具体操作要严格按照科室制定的SOP来做。
Q:请问抗原修复时间,每次一个新抗体都要用不同时间试吗?
答:理论上来说,每一个抗体都要摸索一个最佳的修复条件,但是现实中没有可操作性,大部分实验室每天都是批量工作,不可能针对每一个抗体去摸索条件。但是在一些新的抗体的时候,有条件的话可以试试去摸索一下。以后如果有新的修复方法,包括新的通用型修复液出来的话,尽可能会有一个通用的修复方法。