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达学堂·答疑讨论

Q:冷冻切片,样本角度调节是否有必要?样本头角度能否调节?

答:这个问题在装机的时候是要解决的,样本角度肯定是要调的。我们这边以前还用过大刀片,20cm长的那种钢刀,它的角度有的切片机是0度,有的是5度,还有的是10度,这个角度不是死的,因为我们买的切片刀的角度是不一样的,要根据不同的刀片推荐的角度来进行调整。一般通用的就是5度左右,如果切片不好可以来回调,这个不是固定的。值得注意的是,冷冻切片机的钢材属于特种钢,热胀冷缩现象明显,在常温下,去转动冰冻切片机手柄,阻力很大或根本摇不动,因为常温下钢材膨胀了,只有到-20°C以后,整体温度降下去,切片的时候才会很顺畅,很省力。关于样本头角度问题,在买切片机的时候,要注意机器有标配、有选配,如果没有样本头调节角度的那个配件,那就调不了,角度大概是15至18度,要选配了才可以调。

Q:冰冻机的样本头制冷在平时工作中用处大不大?机箱温度跟样本头差距有多大?

答:样本头制冷常见于双压缩机,并不是说单压缩机不行,只是双压缩机的提供了另外一层保障,特别是我们在做脂肪切片的时候,样本头是要开启制冷的。平常切片的时候,冷冻切片机设置的工作区温度就是-20°C至-25°C,但是特别像甲状腺、肝脏、肾脏、淋巴结、带血块的组织,我们不能设置温度低于-20°C,-15°C左右就行了。如果切片机可以把样本头和刀座分开来设置温度最好,虽然可以简单的同时设置到-20°C至-25°C,但是一般来讲,刀座(刀片)温度应该比样本头低5-10°C。选购冰冻切片机的时候,建议大家选带半导体制冷的,这样可以把冷锤很快降到合适的温度。还有一点,如果是单压缩机,且功率较小,可以用专门的速冻仪冻好后再拿到冰冻切片机里切片。严格来讲,机箱温度(冷冻舱温度)就是样本头温度,对于单压缩机机型来说更是如此。

Q:切片机上石蜡,用什么来清理,夹头弹簧经常不灵,怎样处理?

答:关于石蜡呢,最先强调是每天都做清理,用毛刷都很好地可以刷掉。对于顽固的蜡屑一般最简单的方法就是用加热法。因刀座的材质很特殊,硬度不大,平常有很顽固的石蜡或组织碎屑什么的不建议用金属器具强力铲除!我们是用吹风机来吹,等到蜡屑融化了以后把它擦干净就可以了。如果不想用吹风机的话,可以把整个刀座拆下来,放在烤箱里面,65度左右烤一两个小时,石蜡就会自动流出来,拿出来再擦干净。国内有一些厂家有专门清理石蜡的试剂可以买,不过平时的清理还是最重要的。

Q:冰冻切片冰晶多的原因都有哪些?

答:冰晶是不可能杜绝的,因为冰冻切片的过程,事实上就是冰晶形成的过程,现在要减少冰晶,是减少胞外冰晶,这个胞外冰晶的减少,有这么几点可以注意。第一,标本要尽量不含水,特别是一些含有黏液、体液这些东西,还有像含水丰富的组织像脑组织、乳腺等,我们可以用吸水纸将表面的水吸干一些,这样可以很大范围地减少冰晶。第二,要注意冷冻的时机,平常做冷冻切片的时候,不同操作者有不同的习惯。有人一边打胶的同时将组织放上去;有人是等样本座上面的胶冻到快凝固的时候,再放组织;还有人直接将组织放在样本座上面,我们推荐采用第二种方法。其实冰晶的形成是一个倒金字塔的形状,最开始和冷冻锤相接触的部位,冰晶是最少的,越往下来,越深的部位冰晶就越多,所以这就要求冷锤足够冷。冷锤理想的温度是-40°C以下,如果冷锤的温度达不到,因为长时间地将冷锤压在组织上面,冰晶就会形成更多。缓慢、低效率地冷冻,就是冰晶形成最关键的要素。

Q:速冻冰冻切片机哪款设备好?

答:具体品牌不方便讲,以免广告嫌疑。首先推荐买双压缩机的,然后必须要有帕尔贴半导体制冷,因为只有借助半导体制冷才能快速降到-45°C以下。但也有例外,有一款单压缩机冰冻切片机因设计了冷盐水循环致冷,效果很好。但要注意定时检查盐水储存情况,以免烧毁盐水泵。

Q:我想请问下单压缩机的冰冻切片机,上次我们科室下午来了同时来了近二十个部位的组织快速切片,我们在做到十三四个的时候出现了速冻台升温情况,基本不能冻(在这期间我们速冻按钮一直开着的,大概有二十多分钟)我想问问是哪里出现问题,还有就是这情况怎么可以避免吗?帕尔贴会不会持续使用出现升温状态呢?我试了,可以在时间范围内降到负28度。

答:这种现象很常见,特别像是在南方温度高的时候,有些切片机对环境的要求比较高,要求在切片房装空调,常年维持室温在25°C-28°C,使压缩机的寿命更长。长时间做切片,仓门频繁打开,外面的空气比较热,造成温度上升是很正常的现象。如果有大量冷冻标本的时候,用冰冻切片机时要注意及时关闭舱门,切片时尽量让舱门关闭,尽量减少打开舱门的操作。帕尔贴指的是半导体制冷,理论上可以使局部温度下降到-50°C、-60°C,关于半导体制冷功能,大多数切片机限定了每一次工作时间,最多就10分钟,10分钟以后你还可以开启。还有一点帕尔贴如果无节制的使用,很快就会烧毁。半导体制冷成本很低,但半导体PN结的结构局限使得功率不可能做到很大,也不可能长时间工作(散热问题难以解决)。在有很多冰冻切片的时候,速冻是必须要开的,但要注意随开随关。如果确实是因为温度上升不能做了,也没办法,只能等温度降下来后再继续做,甚至如冷凝管结霜严重还必须化霜后才能继续工作。其实,这种情况的出现主要还是冰冻切片机压缩机功率太小了所致。有时候也许机器显示的温度还有-20°C左右,但就是无法顺利切片。这是因为冰冻切片机的温度传感器一般都安装在冷冻舱深部位置,与速冻台和样本头还有一定的距离。所以,我们建议冰冻切片量大的医院最好能配备两台冰冻切片机,轮流使用,就可以避免无法制片的尴尬。另外,在这种极端情况下,可能会出现一个超时的问题。很多冰冻切片标本扎堆送检,(特别是三甲医院要求单标本制片时限是10分钟),多个标本也要求10分钟做完是不可能的。之前国家卫健委病理质量控制中心开会讨论过这个问题,如果出现标本多的情况,要从临床上找问题,因为这样送检标本与冰冻切片的初衷是不符合的。

Q:切片的时候切片机每个活动的地方丢拧紧了还是会跳片是因为什么呢,是机子哪里需要调一下吗?

答:跳片的话我们首先从切片机本身来找原因,第一,有一种刀片只适合做冰冻切片,如果做石蜡切片的话就很容易跳片。因为每个活动的在方都拧紧了,我们先确定是不是切片刀的问题。第二,看看是否是组织本身的原因,有些硬的组织,无法正常切片,机器不进刀,容易退刀,这个时候我们试试把刀座拆下来,再装回去,把各紧固部件都拧紧以后,如果还有问题,我们就换刀片,或是换一个品牌的刀片。平常买刀片的时候,要注意用于石蜡切片的刀片,除了注意品牌之外,最关键的是要注意刀片的硬度。如果当天所有蜡块都有“跳刀”现象,那就还有一种可能性就是脱水机试剂要彻底检查更换了;如果试剂没问题那就要仔细检查脱水机是否出问题了!
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