达学堂·答疑讨论
Q:请问老师固定液配方?
答:10%中性福尔马林配方:磷酸氢二钠 6.5g ,磷酸二氢钠4g,40%浓甲醛100ml,蒸馏水定量至1000ml,调PH值至7.2。
Q:想请老师讲一讲手工操作的相关问题和改善措施。
答:这个问题太泛,每个环节均可出现问题,你可以将你工作中遇到的问题整理一下,拿出来一起讨论。
Q:我们现在每周两次免疫组化,每次30张片左右,我们是手工做,PBS冲洗后加抗体那一步花的时间比较多,抗体孵育时间按最后一张玻片滴加时间算起的话,前面的就相对孵育时间过长,请问如何快速除去PBS加快滴加抗体的速度?
答:如果加样速度较慢,每10张片算一个时间,减少第一张片与最后一张片的时间差,尽量保证抗体孵育时间一致。加强练习,技术熟练了自然会快。
Q:我们的组化机器,上周做的一张AR的组化片,对照选的同一患者的三粒前列腺组织,结果在同一张玻片上,两边的前列腺显示阳性,中间的前列腺组织显示阴性,这是什么原因呢?
答:首先要确认三粒组织是否全为阳性染色的组织?
Q:关于免疫组化仪,因为玻片质量问题所导致的气泡问题,麻烦老师再讲一遍。我们在切片烤片上的要求有规范标准吗?多厚烤片多久?我们之前出现过大量气泡,一直以为是烤片没考好。
答:讲义上给大家展示的是在Ventana平台检测时,若玻片疏水性比较明显,容易产生讲义上展示的“气泡现象”。切片厚度应根据细胞的密集程度来定,若为淋巴造血组织,细胞密度较高,应薄切(约2um),若细胞密度不大,切片厚度4um。烤片60℃烤60min。
Q:一般仪器多久关一次开关?我们每天至少上三轮,有时候上四轮,几乎不关机!除非有问题请工程师来的时候才有可能关闭开关。
答:日常工作无法关机的情况下,建议每周关一次机。
Q:脱钙液会影响免疫组化的结果吗?如果有,如何避免此问题?
答:无机酸类试剂处理组织后,若组织内的酸未充分清除干净,会影响HE染色及免疫组化染色,脱钙后的组织,要用70%酒精浸泡2-3小时,间中换2-3次酒精,将组织内的酸完全置换出来,以保证后续HE染色及免疫组化检测