达学堂·答疑讨论
Q：请问固定液PH值应该是多少？
答：7.2
Q：抗原修复完后，二甲苯除去浮蜡的建议？
答：抗原修复后不建议再用二甲苯除浮蜡，因二甲苯处理切片后又得经梯度酒精至水，改变了抗原修复后切片所处的缓冲系统，可能会对免疫组化检测带来不良影响。
Q：等到免疫组化笔干燥，再泡到PBS试剂中。但是会存在片子可能也干了，或者组织区域干燥的风险，如何把控？
答：切片从PBS取出后，用纸巾擦干组织两侧的水份，然后画线，不能擦干组织表面的水份，这样是不会干片，玻片上免疫组化笔画的画线很容易干燥（即玻片上的画线不是湿漉漉的即可）
Q：请问每次肌上皮染色效果不好是怎么回事呢？是按照正常流程来的。
答：肌上皮的标记物有几种，请问是哪个标志物标记效果不好？麻烦你将你所使用的肌上皮标志物及你的检测流程一起提供（有照片最好），这样才能正确分析问题出在哪？
Q：冰冻做免疫组化有价值吗？
答：如果某些抗体只能用于新鲜组织冰冻切片进行免疫组化检测，或者某些病例在手术台上需依赖免疫组化协助诊断，再确定手术方案，就很有价值。
Q：冰冻组织做免疫组化，建议抗体孵育时间要怎么掌控？
答：指的是新鲜组织冰冻切片做免疫组化吗？不同品牌一抗，不同检测试剂盒抗体孵育时间会有差异，应根据自己实验的实际条件，测试各种抗体的稀释度及抗体孵育时间。没有特殊要求情况下，如果能用石蜡切片进行免疫组化检测，不建议使用冰冻切片进行免疫组化检测（除外特殊要求）。
Q：那冰冻恰当的解冻方法应该是怎么解冻？
答：做完冰冻的组织块取出后，将样本托放在掌心捂一捂，用镊子迅速分离OCT包裹的组织与样本托，随后将样本切面朝下放入包埋盒内，盖好盒盖，立即将冰冻组织块放入10%福尔马林液中固定。切忌将冰冻组织块放在水笼头流水冲洗或待OCT包埋胶融化后才夹起组织放到固定液。
