达学堂·答疑讨论
Q：苏木素可以和组蛋白以及核膜成分结合吗？
答：染色的原理比较复杂，不是绝对、简单的，是动态的，复杂的。简单讲，组蛋白带正电荷，和苏木素结合力弱，与伊红结合力强，所以不染苏木素、或苏木素染色不行时，核就染成红色了。
Q：靳老师课件中苏木素和伊红这个配液可以用做石蜡切片染色液吗？
答：可以。
Q：想请问下冰冻结束后组织是常温下解冻再固定吗？冻胶需要冲洗干净后才能放固定液吗？
答：常温表面解冻就可以放到固定液。OCT包埋剂可以不用冲，如果冰冻头多、胶也多，就冲一下。
Q：老师一开始说的切片不能晾干再固定会形成空洞，后面怎么又有说晾干再固定可以减少空洞呢？
答：冰冻切片基本原则：及时湿固定。我就怕大家对我后面讲的特殊情况处理会误解。
Q：组织未冷冻时是粘流态吗？
答：粘流态物质会在外力作用下发生不可逆形变，压一下一般不会恢复原状，且要处于流动温度之上。生物大分子/组织细胞有更为复杂的结构，一般室温是处于高弹态的。
Q：肾穿冰冻又为什么推荐吹干染色，而不是固定后染色？
答：肾穿刺免疫荧光都是做的如Ig、C3补体类小分子，都是用荧光做，和我们做的普通抗原有区别，我过去做的时候，都是晾干后直接用PBS洗，不固定，一步法效果也不错。晾干过程是冰晶升华为气态、大分子失水化膜过程（发生和酒精固定相似的作用），可能这种情况更利于暴漏深埋于多糖基质中的小分子抗原物质。
Q：乳腺组织脂肪较多时，冰冻最佳温度及时间是多少呢？
答：冷冻是降温速率比最低温度更重要，当然温度低了降温速率也会更快。新的机子同样的温度冻得组织好切就是这个意思。乳腺建议-25度冻，及时用冷锤，修面不要太深。
