Q：切完片子立马放固定液，老脱片怎么回事?

答：那就要找玻片和切片技术的原因，实际上实质细胞很难掉片，有时含脂肪等组织看起来丝丝拉拉，但镜下实质组织都没有掉。吹干后固定实际上更容易掉片。固定液里含冰醋酸太多也容易掉片。

Q：冰晶形成的原理？从哪里可以查到？四个动态的关系？哪四个动态？

答：非晶体高分子聚合物一般随着温度变化会有粘流态、高弹态、玻璃态三种不同的力学聚集态。在各态转变中又特征性存在流动温度、玻璃化温度、分解温度及脆点。我们冰冻切片就是在组织玻璃态进行。

Q：我做过子宫内膜的干固定和湿固定，两种固定方式的染色结果差异很大，这种情况尤其是在冬天的时候容易发生，请问是为什么呢？

答：冰冻切片要即刻湿固定，晾干固定后染色差。这个原理我在讲课时也分析了。很多情况要结合各地区的自然、室内环境分析，南方冬天湿冷，开空调，反而室内可能更干燥，石蜡切片静电也大、发脆等，冰冻也一样，晾干的程度对染色也有影响。

Q：一般切片厚度是多少？AF固定多少秒？

答：6-7um，理想固定1分钟以上，因切片薄、95%酒精沉淀固定速度又快，一般二、三十秒也可以。

Q：可以分享一下脂肪冰冻切片的经验吗？

答：没有啥好经验，尽量切呗，尽量把脂肪中的实质组织切上就行。市场上的快速冷冻仪，我也试用了，效果也不是很好，仅对含部分脂肪的乳腺等组织好点。有的用丙酮抽提等，我觉得没必要，纯脂肪就是很难玻璃化，切不好是正常的。

Q：表面解冻入固定液的意思是只要可以卸下组织应立即如固定液最好是吗？

答：冷冻组织的解冻是个比较头疼的问题，因为水的传热比冰慢4倍，所以组织冻得快、解冻慢；如果把冷冻的组织立马放到水里（固定液里）组织表面会产生更多的冰晶，缓慢复温时也会产生复温冰晶；理论上快速复温实际中很难操作，所以我一般把冷冻的组织先室温放一会，组织表面变软可以从样本托上轻松取下时放到室温固定液里。

Q：不加OCT组织切的不完整。滤纸感觉能切完整吗？老师冰冻时不用OTC，用滤纸沾湿怎么操作？

答：这个要看组织，有的几块小的组织放在一个样本托上，有的囊壁样组织容易卷，就得用包埋剂；如果你的切片技术过硬，大部分组织不用包埋剂都可以切全。把滤纸剪成样本托大小的圆片，使用时先用中性笔在滤纸边写上编号，再把滤纸在水里蘸湿，放在样本托上，蘸的水不要太少，容易切得时候组织掉下来。