Q：我们常遇到前哨淋巴结，但是总是切不全，轮廓是有的，该怎么处理呢？

答：那就是前哨淋巴结周围有脂肪要去掉，里面有脂肪，脂化了，这个时候切不全，用毛笔拉代替防卷板，切下的片子再用两根毛笔慢慢拉展，脂肪多了也没有啥好办法，为了冻脂肪，冻得过了，脂肪还是没切下，脂肪中的淋巴结脆的切不了，不好弄。

Q：请问冰冻中单纯钙化组织的合适温度是多少，如何能切完整呢？

答：这个没有什么，我们一般是正常温度，-20°C左右就可以，我一般调至-22°C。

Q：脂肪染色那张幻灯没有固定?

答：脂肪染色不用专门固定，经高浓度酒精固定可能会丢失部分脂质；染色前用60%的酒精处理片子也起固定作用。

Q：在冷冻切片的时候你认为那几个温度比需要精确控温？多久上升或者下降一度是可以接受的？

答：一般情况下，如果组织在-16°C以下，大部分组织是可以切出片子的，但是用载玻片粘的时候粘不上，一贴上去很快就要融化一样，所以对于很多组织，-16°C我们可以切，但是要贴附在玻片上，一般要在-18°C以下，这个时候冷冻的玻片比较完善，去贴的话基本也可以贴上。我认为-16°C是一个点， -18度到-25度基本就可以满足临床各种组织切片（脂肪除外）。

Q：AF液的甲醛是百分之40的甲醛吧？

答：甲醛是气体溶于水，就是甲醛溶液，40%的甲醛溶液就叫福尔马林，稀释10倍就是10%的福尔马林，就是我们组织学固定液浓度；我们一般买的商品化甲醛溶液，这就是40%的甲醛，也就是福尔马林，我们配AF液就是95%酒精90ml再加10ml的甲醛溶液。

Q：冰冻固定液我们只用95的酒精，没加甲醛，靳老师认为会存在哪些问题？

答：首先，95酒精也没啥问题，也是良好的固定剂，是可以固定细胞学和冰冻切片的；第二，酒精和甲醛固定最大区别呢，是甲醛固定形成了胶状晶体结构，可以把细胞核、细胞浆里面的好多成分像网一样包起来，让它不容易丢失，酒精固定的话如细胞核蛋白成分可能会丢失、核酸凝聚（细胞核染色不好），有的组织成分收缩比较厉害，比如说甲状腺胶质，用95%酒精固定它就容易掉。

Q：请老师说下晾干固定，怎么操作呢？

答：冰冻切片必须立即固定（不能晾干）这是总的基本要求。但在实际工作中有时碰到细胞核空泡、细胞浆空洞样改变时，把切好的片子拿来在空气中挥动几下，再固定，上述情况会改善，这也是没有办法的办法，不能常用。