达学堂·答疑讨论
Q:请问手工制作原位杂交EBV和HPV片,出现背景是什么原因,怎样避免该情况发生?
答:背景染色发生的原因绝大多数是组织前处理存在问题所致,包括固定不及时,固定时间不足等,所以首先要解决组织前处理问题。操作过程中可能由于杂交时间长或温度高所致。如果是北京中杉金桥的试剂盒,可尝试室温杂交过夜(EBERS)
Q:基层医院免疫组化阳性对照怎么做更加好?因为项目少,然后一个指标对应一个还是芯片阳性对照。
答:可以做成小型组织芯片蜡块(包涵多种不同的组织,根据抗体表达谱自己设计)作为外对照,可同时做多个抗体的外对照。
Q:冰冻块能做组化吗?看书上写了冰晶会影响抗原定位。
答:这位老师问的是做过冰冻的组织块能否做免疫组化?还是冰冻切片能否做免疫组化?两种均可做免疫组化。
Q:全自动机器,新试剂来了,加入机器的瓶子,如果里面还有没用完的,把新的加进去有影响吗?
答:会有影响,尤其是使用时间较长的抗体,添加新抗体前,尽量将原有的抗体先用完。
Q:请问肾脏igg抗体如何去背景?
答:请问这位老师问的是免疫荧光?还是免疫组化?如果是免疫荧光,将抗体再稀释,缩短抗体孵育时间。如果是免疫组化,可尝试改用低PH修复液修复,将抗体再稀释,缩短抗体孵育时间等进行调整,但必须先用阳性对照组织进行测试,测试结果满意后才能用于常规检测。
Q:冰冻后的组织固定后免疫组化不表达为什么?
答:首先要确认该组织是否一定能表达某抗体,如果可以,那可能是冰冻组织块处理存在问题。
Q:高压抗原修复可以用碱修复液吗?
答:可以。