达学堂·答疑讨论
Q：解冻，我们用的胶水，怎么解冻呢？
答：没用过。可用实验组织块尝试跟OCT包埋剂的解冻方式进行解冻，了解组织处理质量。
Q：背景着色属于非特异性着色吗？
答：是的。非特异着色是指在非预期的着色部位出现了染色，引起非特异染色的常见原因有：（1）组织固定不及时，抗原弥散，导致定位不清；（2）抗体浓度过浓，不该着染的成分出现染色：（3）抗体孵育时间过长；或抗原修复时间过长，导致非特异染色；（4）抗体质量欠佳，特异性差，导致所有组织均着染；（5）PBS漂洗时间过短。
Q：pAX5做了怎样的处理？
答：讲义上讲的：延长了抗原修复时间及抗体孵育时间。
Q：请教一下做出来的片子出现完全未染上色的情况 你们是怎么处理的？
答：首先查找白片发生的原因，在确保组织处理质量的前提下，着重检查检测过程是否存在不足，如果是手工染色：检查有没遗漏操作步骤；抗原修复是否达到要求？修复液是否配错？有没有加错抗体（尤其是没有内对照及外对照的情况下）；如果是机器全自动检测：确认抗体试剂量是否充足？缓冲液配置是否有问题？若单位内部组织处理经常存在问题，则先了解样本处理环节是否存在问题？
Q：细胞涂片检测免疫组化怎么修复比较合适？
答：细胞涂片若用酒清固定可以不用抗原修复，若需抗原修复可选用温和一点的修复方式，如水浴。
Q：OTC胶会不会对组织脱水有影响？
答：OCT包埋剂溶于水，冰冻组织块应单独用一个装有固定液的盆溶解组织上的OCT包埋胶，然后再转移到无包埋胶的固定液中。
Q：请问如何做每张切片的阴阳对照呢？
答：每种抗体均有特定的表达谱，取该抗体阳性表达的组织做阳性外对照，不表达的组织做阴性对照，将阳性及阴性组织包在同一蜡块上，只要检测这种抗体，同一切片上捞上阳阴性对照组织。
