当病理报告上写着“PD-L1阳性”，为什么还要追问信号来自什么细胞？这个问题并不只是病理学上的细节，它关系到我们如何理解一份PD-L1报告，也决定了后续是否需要复核样本、关注肿瘤异质性，或进一步观察肿瘤周围的免疫环境。
为什么要区分PD-L1来自谁？
PD-1与PD-L1是免疫调节通路的重要组成。PD-L1与PD-1结合后，可抑制T细胞活化和杀伤功能。部分肿瘤会利用这套机制，通过表达PD-L1降低免疫细胞的攻击。因此，一句“PD-L1阳性”只能说明组织中出现了这一信号，却不一定告诉我们信号来自哪类细胞。
在非小细胞肺癌中，PD-L1检测已进入标准诊疗路径。常用的肿瘤细胞阳性比例评分（TPS）主要计算PD-L1阳性的存活肿瘤细胞比例；其他检测体系还可能评价肿瘤浸润免疫细胞。因此，切片中PD-L1阳性细胞较多，并不一定等同于肿瘤细胞TPS升高。
真实样本中，难点往往是“认清细胞”
真实临床样本中的肿瘤细胞与免疫细胞往往交错分布，并不会整齐分开。尤其在小活检组织、炎症背景丰富的区域，或存在腺腔内巨噬细胞、坏死、低分化形态时，判断PD-L1阳性信号究竟来自肿瘤细胞还是免疫细胞，可能会变得更加困难。若检测结果接近关键阈值，不同取材区域或不同蜡块之间的差异，也可能进一步影响整体判断。
mIHC如何把“阳性信号”还原成“细胞身份”？
传统单标免疫组化通常一次重点观察一个指标。检测PD-L1时，可以看到哪些区域出现阳性信号，但当肿瘤细胞和免疫细胞紧密混杂时，仅凭一种标志物，有时难以直观看清信号属于何种细胞。
mIHC，即多重免疫组化或多重免疫荧光，可以在同一张组织切片上同时检测多个标志物，相当于给不同细胞贴上“身份标签”。例如：PanCK用于识别上皮来源的肿瘤细胞，CD68用于识别巨噬细胞，CD8用于识别细胞毒性T细胞，PD-L1显示目标信号，DAPI则帮助定位细胞核。
当这些信号位于同一张切片、同一组织区域时，就可以进一步观察：PanCK⁺PD-L1⁺细胞是否为主要阳性来源，CD68⁺PD-L1⁺巨噬细胞是否大量存在，CD8⁺T细胞位于肿瘤内部、浸润边缘还是间质，以及不同细胞之间是否形成聚集或相互隔离。
那么，mIHC实际输出的图像是什么样的？下图是我们对四标染色的融合结果。
染色：达优Biosci 4090131；扫描：达科为Fluovita FV04R
能为临床增加什么信息？
•帮助复核疑难PD-L1区域。当肿瘤细胞与巨噬细胞混杂、炎症背景明显或阳性结果接近关键阈值时，mIHC可以补充显示阳性细胞的身份，为病理复阅提供更直观的参考。
•帮助理解样本异质性。同一患者的不同蜡块、原发灶与转移灶，甚至同一肿瘤的中心和边缘，PD-L1表达及免疫细胞分布都可能不同。mIHC可以帮助呈现这种区域差异，并提示是否需要结合其他组织块或新取材样本综合判断。
•帮助解释“相同PD-L1结果下的不同微环境”。两份报告都可能写着PD-L1阳性，但一份以肿瘤细胞表达为主，另一份则伴有较多PD-L1阳性巨噬细胞和不同程度的CD8浸润。mIHC能够把这种差异从一个数字扩展为一幅组织图景。
•支持治疗前后样本和临床队列分析。在新辅助治疗、免疫治疗或耐药病例的研究中，可以比较治疗前后PD-L1来源、CD8分布及巨噬细胞组成的变化，为病例总结、MDT讨论和临床研究提供结构化数据。
我司可提供mIHC相关产品与技术配套：
· TSA试剂盒：用于信号放大，支持四色/五色/六色/七色方案；
· 抗体资源：覆盖1000+靶点的一抗产品，可灵活组合；
· 多通道荧光玻片扫描仪：适用于mIHC、FISH等多标记样本成像，衔接数字病理与空间分析流程；
· 分析软件：成熟稳定，支持多种图像分析与量化需求；
· 技术服务：协助Panel设计、染色操作及问题排查，保障项目顺利推进。
从“有没有表达”到“是谁在表达”，从一个阳性信号到一张细胞身份与空间关系地图——这正是mIHC观察肿瘤微环境的新视角。
